什么是
大鼠少突膠質(zhì)前體細胞的原代培養(yǎng)?嚴格地說原代細胞培養(yǎng)是指從動物機體取出的組織經(jīng)各種酶、螯合劑或機械方法處理,分散成單細胞,選用合適的培養(yǎng)基在體外進行的首次培養(yǎng),也叫初代培養(yǎng)。通常把一代至十代以內(nèi)的培養(yǎng)細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。
原代細胞培養(yǎng)主要包括取材→分離→培養(yǎng)等三部分。原代培養(yǎng)是建立各種細胞系的開始,是實驗人員需掌握的一項基本技術(shù)。原代培養(yǎng)的細胞其生物學特性未發(fā)生很大變化,接近和能反映體內(nèi)生長特性,仍具有二倍體遺傳特性,因此適用于藥物敏感性試驗、細胞分化、細胞生長代謝等實驗研究。
大鼠少突膠質(zhì)前體細胞取材應該注意什么?
動物體內(nèi)大部分的組織細胞都可以在體外培養(yǎng),但其難易程度與組織類型、分化程度、供體年齡、供體健康狀態(tài)、原代培養(yǎng)方式等有直接關(guān)系,也是決定原代培養(yǎng)成敗的關(guān)鍵。
因此原代取材我們應滿足以下要求:
1、取材時注意無菌操作,使用的手術(shù)器械、培養(yǎng)皿以及試劑都應保證無菌;
2、使用的手術(shù)器械應鋒利,使其在剪碎組織的時候盡可能減少對細胞的機械損傷;
3、對組織樣本帶有血液、脂肪、結(jié)締組織的,在處理組織時應盡可能去除這些非目的組織;
4、如無特殊要求,可采用更加容易培養(yǎng)的組織進行培養(yǎng),提高培養(yǎng)成功率;
5、取材過程盡量要快,保證組織新鮮;
6、原代培養(yǎng)應采用應用豐富的培養(yǎng)液,一般添加5%-20%胎牛血清;
7、對組織的來源、部位、取材時間、處理方法以及供體的一般情況都需做好記錄。