小鼠II型肺泡上皮細(xì)胞分離自肺組織;肺泡肺內(nèi)最基本的呼吸單位,是氣體交換的主要場(chǎng)所,是多面形的薄膜囊泡,一面與肺泡囊或肺泡管相通,其他各面與肺泡毛細(xì)血管網(wǎng)或相鄰的肺泡相接。
肺泡壁表面覆蓋有肺泡上皮,肺泡之間有一薄層結(jié)締組織,內(nèi)含豐富的毛細(xì)血管網(wǎng)及大量的彈力纖維和巨噬細(xì)胞,肺泡壁上有小孔,稱肺泡孔,肺泡與毛細(xì)血管間的隔膜稱氣血屏障,它十分菲薄,由毛細(xì)血管內(nèi)皮、基底膜和肺泡上皮、基底膜及其間彈力纖維、膠原纖維等組成,肺泡細(xì)胞又叫粒性細(xì)胞、大肺泡細(xì)胞,系肺泡上皮細(xì)胞的一種。
小鼠II型肺泡上皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合灌注消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,是肺細(xì)胞的主要類型之一,可用于分析肺上皮細(xì)胞對(duì)外界因素的反應(yīng),對(duì)于研究肺的發(fā)育、損傷和修復(fù)。
次分離小鼠肺泡上皮細(xì)胞是很棘手的,肺上皮細(xì)胞周圍有大量的白細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞需要分離。更復(fù)雜的是需要通過分散酶消化而從肺的細(xì)胞外基質(zhì)中釋放出來,分散酶能特異性地裂解存在于基底膜中的IV型膠原蛋白和纖連蛋白,需要通過氣管艱難地注入,是各高校及研究的細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、病理學(xué)、生物醫(yī)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)等實(shí)驗(yàn)室常備細(xì)胞。
肺泡上皮細(xì)胞體形極微,表面有由磷脂雙分子層與鑲嵌的蛋白質(zhì)及糖被構(gòu)成的生物膜,內(nèi)含遺傳物質(zhì),無機(jī)物有機(jī)物兩大類化學(xué)物質(zhì)。細(xì)胞增殖是以一分為二的形式進(jìn)行分裂,通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物,是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群,將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,使肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,對(duì)細(xì)胞造成損害。