小鼠肝細胞作為一個生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域常用的細胞實驗?zāi)P?,?jīng)常為廣大科研工作者所接觸,細胞的培養(yǎng)在實驗中起到根基作用,如何爭取的培養(yǎng)與使用,則是應(yīng)用實操的關(guān)鍵。
目前細胞庫內(nèi)常用的肝細胞系有GHA1、AML12、BNL CL.2及各原代定制。動物細胞在體內(nèi)有嚴密的組織結(jié)構(gòu),多數(shù)組織的形態(tài)是固體結(jié)構(gòu),細胞與細胞或者細胞與細胞間質(zhì)之間聯(lián)系緊密,要得到大量的離散細胞就必須進行人工分離(消化培養(yǎng)),也有部分組織的細胞自然狀態(tài)下就是松散的,從體內(nèi)取出后不用處理(如血細胞)或稍加處理(如脾細胞)就可以得到細胞懸液。細胞離散后由于每個細胞都能與支持物接觸,營養(yǎng)供應(yīng)均勻,因此適應(yīng)快、增殖快、建系快。
肝臟是由肝細胞組成,肝細胞極小,肉眼看不到,必須通過顯微鏡才能看到。人肝約有25億個肝細胞,50個肝細胞組成一個肝小葉,因此人肝的肝小葉總數(shù)約有50萬個。肝細胞為多角形,直徑約為20微米,有6-8個面,不同的生理條件下大小有差異,如饑餓時肝細胞體積變大。每個肝細胞表面可分為竇狀隙面、肝細胞面和膽小管面三種。肝細胞里面含有許許多多復(fù)雜的細微結(jié)構(gòu):如肝細胞核、肝細胞質(zhì)、線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、溶酶體、高爾基氏體、微粒體及飲液泡等組成。
肝細胞具有多種功能且代謝旺盛,離體培養(yǎng)的大鼠肝細胞用于毒理學(xué)、藥理學(xué)、生物化學(xué)及致癌作用等研究有許多優(yōu)點。醫(yī)學(xué)上常培養(yǎng)肝細胞作為理想的體外模型,在肝病研究、護肝藥物的研發(fā)等諸多方面發(fā)揮著日益重要的作用,但肝細胞在體外增殖能力差,原代培養(yǎng)難以成功,故在一定程度上限制了肝細胞培養(yǎng)的廣泛開展,制備小鼠肝細胞常用的方法有非酶分離細胞法、離體肝臟酶消化分離法以及在體肝臟酶灌注法。