小鼠肝細胞通常指小鼠肝實質(zhì)細胞。在動物體正常生理和病理條件下，肝臟在能量代謝、外源物質(zhì)的生物轉化、基質(zhì)蛋白的合成、解毒等方面發(fā)揮著其重要的作用。肝實質(zhì)細胞是指具有肝功能的基本組成單位，大約占肝臟體積及數(shù)量的80%左右，肝實質(zhì)細胞具有多方面的功能，例如：蛋白質(zhì)的合成和儲存、分泌膽汁和解毒物質(zhì)等。肝實質(zhì)細胞體外常常被用作研究肝臟功能、能量代謝和肝臟疾病的良好模型
小鼠肝細胞試驗方法：
1.將小鼠斷頸致死，置75%酒精泡2-3秒鐘，取肝臟，置于盛有PBS的平皿中。
2.剔除脂肪、結締組織、血液等雜物，轉移到另一個盛有PBS液的平皿中。
2.3用手術剪將臟器剪成小塊(大小約1mm2)，玻片研磨，轉到離心管，離心(1000rpm，5min)。
4.視組織或細胞量加入5-6倍(3-5ml)胰酶，37℃中消化20分鐘，每隔5分鐘振蕩一次，或用吸管吹打一次，使細胞分離。
5.加入3-5ml含血清的培養(yǎng)液以中止胰酶消化作用。
6.用100目孔徑濾網(wǎng)濾過，除去未消化的大組織塊。
7.再次離心5min，棄上清液。
8.加入無血清培養(yǎng)液5ml，沖散細胞，再離心一次，棄上清液。
9.加入含血清的培養(yǎng)液1-2ml(視細胞量)，血球計數(shù)板計數(shù)。
10.將細胞調(diào)整到5×105/ml左右，轉移至6孔培養(yǎng)板中，37℃下培養(yǎng)。
更新時間：2022-05-20
點擊次數(shù)：1791
當前位置：
